肺隐球菌病的肺泡灌洗液检查

肺隐球菌病是由新生隐球菌感染所引起的亚急性或慢性深部真菌病。近年来,其发病率增加明显,与抗生素的广泛应用、恶性肿瘤的放化疗、艾滋病的流行等密切相关,也与我们对肺隐球菌病的认识和诊断技术的提高有关。

隐球菌属为单细胞真菌,呈圆形或卵圆形,直径5-12μm,能保留革兰染色,菌体被宽厚的荚膜包裹,不形成菌丝和孢子,依赖出芽生殖。引起人类感染的主要为新型隐球菌,主要包括3个变种:新生变种、格特变种、格鲁比变种,我国以新生变种为主。

新生隐球菌为条件致病性真菌,广泛分布于自然界,鸽粪、土壤及腐木是重要的传染源。气溶胶颗粒吸入是最主要的进入人体的方式,在肺内形成感染灶,其临床表现无特异性,症状轻重不一。

支气管肺泡灌洗术通过纤维支气管镜对支气管以下肺段或亚肺段水平,反复以无菌生理盐水灌洗、回收灌洗液,标本分别送检细胞分类、涂片染色、细菌培养、乳胶凝集及病理等进行一系列检测和分析,从而获得下呼吸道病变的性质特点和活动程度,有助于明确诊断。

一,灌洗液离心取沉渣推片做瑞氏染色行细胞学分类,呈现淋巴-肺泡吞噬细胞反应型,可见吞噬较多真菌孢子,有一层薄的荚膜。

沉渣作墨汁染色,因大部分隐球菌被吞噬看不到荚膜,胞外散在隐球菌偶见,可见一圈较窄的荚膜。

二,灌洗液沉渣涂片行革兰染色查细菌真菌,可见较多染黑色,部分着色不均的圆形、椭圆形孢子,外面包裹大小不一的荚膜。

三,灌洗液离心取上清做乳胶凝集实验检测其荚膜多糖抗原。我科采用胶体金法(双抗夹心法),敏感性和特异性均较高。

四,灌洗液沉渣划平板做细菌培养,培养数日后血平板上可见较小,白色、湿润、凸起的圆形菌落。挑纯菌落革兰染色,见大量深染圆形孢子,孢子间可见丝连现象。

利用VITEKMS质谱仪迅速准确的菌种鉴定,新生隐球菌的特征峰集中在~amu。

由于肺隐球菌病患者的临床表现无特异性,甚至部分患者无任何症状,胸部影像学又表现为多样性,因此经常误诊。所以可以采取肺泡灌洗液标本细胞学和病原学的联合检测提高其诊断价值。

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邹安庆

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