检验临床面对面HIV感染合并新型隐球

前段时间,科室遇到HIV感染合并新型隐球菌死亡病例一例。患者为中年女性,42岁,入院前几个月前诊断为肾病综合征,并开始不间断使用激素治疗,入院前5天发热38.1℃,在当地诊所当作普通感冒治疗,退热后出现头枕部疼痛,伴乏力纳差,剧烈呕吐。刚入院时收入某内科病房,神志清晰,贫血貌,检查合作。抽血得知血糖:10.81mmol/L,血常规中性粒高:0.90,淋巴细胞比例很低,白细胞总数:8.79×10^9/L,降钙素原:0.05ng/ml,低钠,低钾。胸部CT:支气管疾患并感染,头部CT:未见明显异常。当日血培养送检,抽脑脊液送检:常规与墨汁染色;脑脊液生化;脑脊液培养与革兰染色、抗酸染色。当晚脑脊液墨汁染色发现隐球菌,迅速回报病房。

病房经过系列详细检查,诊断结果为:隐球菌性脑膜炎、肾病综合征、Ⅱ型糖尿病、肺部感染、电解质紊乱(低钠、低钾血症),并且有颅内压增高。

第二天,检验科免疫室报告患者HIV初筛阳性,重新抽血送疾控中心做确证实验。当天微生物室也报告患者血培养53小时报阳,涂片见革兰阳性菌。

患者转入神经内科,积极控制颅内压及抗真菌、营养支持等治疗。抗隐球菌的首选药物为两性霉素B,考虑到患者病情严重且耐受力差,实际选用氟康唑。在神经内科的诊疗过程中,患者病情反复,最后陷入昏迷状态,数天后转至重症监护科,经抢救1天后仍昏迷,双侧瞳孔散大固定,随时有生命危险,家属商量后决定放弃治疗,签字出院,隔日得知死亡。

几天后,市CDC回报该病人确证为HIV阳性。脑脊液亦培养出新型隐球菌。培养菌落涂片如下:

培养菌落做墨汁染色如下:

大家均知,新型隐球菌是条件致病菌,健康人群有足够的抵抗力,好发于细胞免疫功能低下者,如艾滋病、糖尿病、恶性肿瘤患者,器官移植及大剂量使用糖皮质激素者。此病人为HIV感染患者,又几个月前不间断使用激素治疗,可能造成患者细胞免疫功能低下,感染了新型隐球菌。新型隐球菌主要侵犯肺、脑及脑膜,常见疾病是脑膜炎,也可侵犯皮肤、骨、关节和心脏等部位,起病急,预后差。此患者为典型的隐球菌性脑膜炎,有资料显示隐球菌是AIDS最常见的并发症之一,是AIDS死亡的首要原因。

新型隐球菌特征

新型隐球菌为圆形,菌体外有宽厚的荚膜,荚膜比菌体大1-3倍,折光性强,一般染色法不易着色,常用墨汁负染色法,可见圆形菌体外绕有一较宽阔的空白带(荚膜)。革兰氏染色为阳性。菌细胞常有出芽,但无假菌丝。

新型隐球菌的检测方法

1、墨汁染色法:新鲜标本墨汁染色直接涂片找有厚荚膜和(或)有出芽的菌细胞,墨汁太浓或太淡都不好看,有专家建议标本与墨汁比例为5:1左右。

2、培养法:脑脊液、痰液、组织物接种血平板、沙氏平板、增菌肉汤培养。脑脊液血培养,用血培养儿童瓶,接种量1ml左右。新型隐球菌在沙氏培养基上25℃和37℃时均可生长,菌落形态白色或奶油色,黏稠,不透明。在血平板上为半透明,黏稠,生长较慢,培养第二天菌落细小,随时间延长慢慢变为淡黄色。

3、荚膜多糖抗原检测法及核酸检测:快速,简便,可早期诊断,有较高的敏感性与特异性。

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郑华国
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