EBV感染插画式解读
EB病毒是嗜人类淋巴细胞的疱疹病毒，人群普遍易感，相关疾病多样。EB病毒的感染机制复杂，选择适当的方法，对于EBV相关疾病的诊断和治疗十分重要。
转载自：ProfessorDaveExplains
Epstein-BarrVirus速读指南
EBV感染类型与EBV相关疾病
EB病毒（Epstein-Barrvirus，EBV）：
双链DNA病毒，感染后环化且能自我复制；原发感染后建立终身潜伏感染。
EBV潜伏感染表达标志物：
①2种不翻译成蛋白的RNA：EBER1和EBER2；
②6种核抗原：EBNA1、EBNA2、EBNA3A、EBNA3B、EBNA3C和LP；
③2种潜伏期膜蛋白：LMP1、LMP2A/B；
EBV感染相关疾病：
①非肿瘤相关：原发性感染致传染性单核细胞增多症、慢性活动性EBV感染、EBV相关噬血细胞性淋巴组织细胞增生症；
②肿瘤相关：霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、鼻咽癌、胃癌等；
EBV潜伏感染特点：
①潜伏感染0型：在健康的EBV既往感染个体，EBV在记忆性Ｂ细胞潜伏，只表达EBERs，也称为健康携带者。
②潜伏感染I型：除EBERs外，EBV只表达EBNA1和BamHIA右侧片段（BARTs），如Burkitts淋巴瘤；
③潜伏感染II型：表达EBNA1、LMP1、LMP2、BARTS、EBERs，如鼻咽癌、霍奇金淋巴瘤；
④潜伏感染III型：表达所有的潜伏感染基因，如免疫抑制病人的淋巴组织增生性疾病。
图1EBV感染机制
EBERs感染实验室诊断方法
针对不同的EBV感染相关疾病，选择适当的临床标本和实验室检测方法，对于EBV感染相关疾病的诊断和治疗十分重要。
EBV感染实验室常用方法：
EBV特异性抗体检测；嗜异凝集抗体检测；EBV核酸载量检测；EBERs原位杂交实验。
（1）EBV特异性抗体检测：
机体对EBV编码的多种结构抗原产生免疫，病毒衣壳抗原（VCA）、早期抗原（EA）、膜抗原（MA）、核抗原（NA）；
样本来源：血清或血浆；
主要方法：ELISA和化学发光；
以下列举了三种感染情况的抗体检测
原发性EBV感染：抗VCA-IgM/IgG；
急性感染后期：抗EA-IgG；
恢复期晚期：抗EBNA-IgG；
值得一提的是持续性EBV抗原刺激：VCA-IgA（+）、EA-IgA（+），常用于肿瘤的诊断与检测；
临床意义：抗VCA-IgM、抗VCA-IgG、抗EBNA-IgG区分原发感染和既往感染；
存在问题：EBV感染后血清学反应复杂多样，有时难以解释感染状态；
（2）嗜异凝集素抗体检测：
嗜异凝集素抗体为IgM抗体，在病程第1-2周出现，病程五周内达到高峰；
样本来源：血清或血浆；
检测方法：试管法或血凝反应板法；
临床意义：抗体缺乏特异性，易与原发性巨细胞病毒感染、自身免疫性疾病或肿瘤也呈阳性反应。
（3）EBV核酸载量检测：
EBV-DNA载量测定被广泛用于EBV相关疾病诊断、病情监测、治疗效果评估和预后判断；
样本来源：外周血、无菌体液（肺泡灌洗液、脑脊液等）；
检测方法：实时荧光定量PCR法；
临床意义：不同临床样本中EBV-DNA检测结果意义不同。
血清或血浆中EBV-DNA阳性提示患者体内活动性EBV感染或疾病与EBV密切相关（如原发EBV感染早期及相关肿瘤等），需要结合临床表现和其他检查结果综合判断；
血清或血浆中EBV-DNA阴性提示为EBV健康携带者、未感染过EBV患者、非EBV相关疾病患者；
（4）EBERs原位杂交实验
EBERs(EBER1/EBER2)是EBV编码的不翻译成蛋白质的RNA。EBERs大量存在于EBV潜伏感染的细胞中，每个细胞可达10６-10７拷贝，是EBV潜伏感染的最好标志物，其主要功能是抑制干扰素介导的抗病毒效应和凋亡。
标本来源：病理组织或细胞涂片；
检测方法：原位杂交；
临床意义：原位杂交检测EBERs能够定位EBV感染的细胞类型，明确疾病与EBV相关的直接证据，是明确肿瘤与EBV相关的金标准。
以上四种实验室诊断方法采用的标本类型、检测方法及特点见下表：
EBV实验室诊断方法的临床应用
EBV感染与多种临床疾病相关，实验室诊断方法的选择、临床样本选择对于EBV相关疾病的诊断和治疗十分重要；
（1）原发性EBV感染相关疾病
1.IM传染性单核细胞增多症
IM是原发性EBV感染引起的良性自限性疾病，其典型临床表现为发热、咽峡炎和颈淋巴结肿大的“三联征”，外周血淋巴细胞显著增多并出现异型淋巴细胞，可合并肝脾肿大和肝功能异常。多数预后良好，少数可出现严重并发症，如噬血细胞性淋巴组织细胞增生症（HLH）;
临床诊断：
对于免疫功能正常的患者，EBV特异性抗体检测结合抗体亲和力检测仍然是诊断IM的金标准；如无法确定，血清或血浆标本EBV-DNA载量检测；
对于免疫缺陷患者，EBV抗体检测价值有限，通常使用全血或PBMC标本进行EBV-DNA动态检测；
检测指标：抗VCA-IgM/IgG（+）、抗EBNA-IgG（-）；或抗VCA-IgM（-）、低亲和力抗VCA-IgG（+）；如无法确定，血清或血浆标本进行EBV-DNA载量检测；
2.EBV脑膜炎或脑炎、心肌炎、间质性肺炎等
临床诊断：
血清或血浆中EBV特异性抗体检测符合原发性EBV感染；脑脊液标本EBV-DNA检测阳性有助于EBV感染脑膜炎或脑炎的诊断；肺泡灌洗液标本EBV-DNA检测阳性有助于EBV感染间质性肺炎的诊断；病理组织样本（如心肌活检组织等）EBERs原位杂交阳性是明确本次疾病与EBV相关的最直接的证据；
（2）持续性或再激活EBV感染相关疾病
1.CAEBV慢性活动性EBV感染
CAEBV是一种严重的EBV感染疾病，其临床表现是IM样症状持续或反复发作，并逐渐出现多种器官的慢性损害，如持续性肝功能损害、多发性淋巴结病、肝脾大、噬血细胞综合征、视网膜炎、间质性肺炎、牛痘样水疱病及蚊虫叮咬过敏等。
临床诊断：
尚无免疫酶学方法对应的界定阈值；主要进行外周血EBV-DNA载量检测；CAEBV受累器官活检组织标本和外周血中EBV感染的B/T/NK细胞EBERs原位杂交；
诊断指标：
EBV-DNA（+）、EBERs阳性；
2.EBV-HLHEBV相关噬血细胞性淋巴组织细胞增生症
EBV-HLH是淋巴细胞、巨噬细胞异常增生和活化，以发热、肝脾肿大、血细胞减低、高甘油三脂血症和（或）低纤维蛋白原血症为特点的临床综合征，是一种严重威胁患者生命的过度炎症反应综合征。EBV原发感染和再激活均可引起EBV-HLH。
临床诊断：
血清抗体检测呈多种反应类型，血清/血浆中EBV-DNA载量有助于评估治疗效果；外周血中B/T/NK细胞中EBERs阳性。
诊断指标：
EBV-DNA（+）、EBERs阳性；
（3）肿瘤相关性疾病
1.NPC鼻咽癌
NPC是目前最为明确的与EBV感染相关的人类上皮性肿瘤，位列中国肿瘤发病率前10位，尤其在两广等南方地区发病率最高，故又被称为“广东癌”。在流行地区，WHOIII型非角质化未分化（主要亚型）NPC肿瘤组织中几乎全部可以检测到EBV基因组；
临床诊断：
EBV特异性抗体检测结果为EBV既往感染或再激活，免疫酶法检测抗VCA-IgA、抗EBNA1-IgA；血清/血浆EBV-DNA用于NPC筛查及预后；肿瘤细胞EBERs原位杂交；
诊断指标：
VCA-IgA（+）、EBNA1-IgA（+）、EBV-DNA（+）、EBERs阳性；
2.淋巴瘤
EBV相关淋巴瘤主要包括HL和NHL，其中经典HL中的混合细胞型，NHL中的Burkitt淋巴瘤（非洲）以及结外NK/T细胞淋巴瘤（鼻型）与EBV密切相关；
临床诊断：
EBV特异性抗体检测结果为EBV既往感染或再激活；血清/血浆EBV-DNA用于NPC筛查及预后；肿瘤细胞EBERs原位杂交；
诊断指标：
VCA-IgA（+）、EBNA1-IgA（+）、EBV-DNA（+）、EBERs阳性；
（4）PTLD移植后淋巴细胞增殖症
PTLD是实体器官移植或骨髓移植、造血干细胞移植后发生的一种严重并发症，是移植后持续免疫缺陷下发生的一种由增生性到肿瘤性的淋巴系统增殖。大约80%-90%的PTLD与EBV感染有关，移植患者监测EBV感染至关重要。
临床诊断：
EBV特异性抗体检测价值有限；血浆中EBV-DNA载量检测有助于评估PTLD治疗效果；组织活检病理是PTLD诊断金标准，EBERs原位杂交是唯一能够定位肿瘤细胞存在EBV的实验室方法；
诊断指标：
EBERs阳性
总结
1.查找病因：分清是EBV的潜伏感染还是EBV感染导致的疾病状态。
2.鉴别非肿瘤性疾病：如传染性单核细胞增多症、慢性活动性EBV感染等。
3.肿瘤性疾病的鉴别诊断：如HIV感染相关淋巴瘤、Burkitt淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、鼻型NK/T淋巴瘤、鼻咽癌和淋巴上皮癌等。
4.指导治疗和预后：
1）EBV感染性疾病：抗病毒治疗，预后好；
2）器官移植后淋巴增生性疾病：早期预后较好；
3）EBV阳性的非霍奇金淋巴瘤比EBV阴性的预后差；EBV阳性的霍奇金淋巴瘤比EBV阴性的预后好或无显著性差异；
4）鼻型NK/T细胞淋巴瘤预后很差。
参考文献：
[1]谢正德,刘春艳,艾军红.EB病毒感染实验室诊断及临床应用专家共识[J].中华实验和临床病毒学杂志,,32(01):2-8.
[2]CohenJI.Epstein–BarrVirusInfection.NEnglJMed,(7):-.
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