作者：黄金伟/医院抗生素临床应用指导中心
案例经过：
“喂，小朱呀！等会儿送过来一个脑脊液标本，帮忙找下抗酸杆菌和隐球菌”临近下班时分笔者接到了感染科医生的电话。这是一个老年男性患者，13天前无明显诱因下出现恶心、呕吐，呕吐胃内容物数次，10天前患者自觉低热并乏力、头晕，门诊拟“中枢神经系统感染”收住入院。
送到微生物实验室的是半管外观较澄清的脑脊液标本，笔者收到标本后立马离心处理，大剂量接种ul后做涂片检查。同时做抗酸染色和墨汁负染色。
抗酸染色阴性，墨汁负染色涂片（约25ul脑脊液+5ul墨汁）也没有发现阳性视野，难道这份脑脊液标本真的是没有东西？
可惜基层实验室没有隐球菌抗原检测试剂盒，这时候该咋办？
不妨看看脑脊液常规和生化指标，常规提示白细胞升高，潘氏试验阳性，生化提示氯化物下降，总蛋白升高。临床症状又符合感染，决定还是再染几张片看看。
重新染了几张墨汁负染色涂片，没有还是没有，抬头看看时间已经下班半个多小时了。先汇报阴性结果吗？但这份脑脊液标本镜下白细胞量的确是增多的。
第四张片子时终于看到黑黑的背景中一个透亮的视野，宽厚的荚膜包裹着较小的菌体，典型的阳性视野！
当即向临床医生汇报结果，临床医生本来已准备开始进行抗结核治疗了，这个结果来的正是及时。两天后的培养平板上仅长了聊聊几个菌落，经鉴定证实是新型隐球菌。
分析与心得：
隐球菌脑膜炎感染的脑脊液标本往往外观较为澄清，需要离心后做墨汁负染色找隐球菌。脑脊液标本接种时，需要离心后取沉渣大剂量接种，以防止因接种量不足导致假阴性。
对于此例而言，墨汁负染色涂片4张才找到一个阳性视野，可见这份脑脊液标本菌量有多么少。通常实验室都是仅仅做墨汁负染色涂片一张，在菌量如此少的情况下涂片漏检几乎是必然的。
大多数基层实验室可能尚且未开展隐球菌抗原检测试验，因此对于这类怀疑隐球菌感染的标本，一张涂片未检出的情况下多做几张墨汁负染色涂片显得尤其重要。
通常情况下多数临床微生物实验室收到标本后往往对患者的信息了解较少，对于这种特殊病例临床医生给予提示性考虑会给实验室下一步操作带来更好的方向。
对于怀疑隐球菌感染的脑脊液标本，有时需要多做几张墨汁负染色涂片。
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